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土壤過(guò)氧化物酶(S-POD)活性檢測試劑盒(分光光度法)
中文名稱(chēng):土壤過(guò)氧化物酶(S-POD)活性檢測試劑盒
儲存條件:2-8℃
單位:盒
有效期:6個(gè)月
英文名稱(chēng):Soil Peroxidase(S-POD)Activity Assay Kit
檢測方法:可見(jiàn)分光光度法 Spectrophotometer
規格:50T/24S
測定意義:S-POD 主要來(lái)源于土壤微生物,能夠氧化土壤有機物質(zhì)產(chǎn)生過(guò)氧化物,在腐殖質(zhì)的形成過(guò)程中具有重要作用。
測定原理:S-POD 催化有機物質(zhì)氧化成醌,后者在430nm 有特征光吸收。
自備用品:可見(jiàn)分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1mL 玻璃比色皿、ym100mL(不允許快遞)、研缽、冰和蒸餾水。
備注:
以上數據均來(lái)自公開(kāi)文獻,暫未進(jìn)行獨立驗證, 僅供參考。
產(chǎn)品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶?jì)润w積是否一致,有疑問(wèn)請及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱(chēng) 規格 保存條件
試劑一 粉劑×2 瓶 2-8°C保存
試劑二 液體 5 mL×1 瓶 2-8°C保存
試劑三 液體 10 mL×1 瓶 2-8°C保存
試劑四 液體 100 mL×1 瓶(自備) 2-8°C保存
標準品 液體 10 mL×1 瓶 2-8°C保存
溶液的配制:
1、 試劑一:臨用前加入 10 mL 蒸餾水,用不完的試劑 2-8°C保存一周;
2、 試劑四:自備ym;
3、 標準品:相當于每 1mL ym相中含有 0.2mg/mL 紫色沒(méi)食子素。
產(chǎn)品說(shuō)明:
S-POD主要來(lái)源于土壤微生物,能夠氧化土壤有機物質(zhì)產(chǎn)生過(guò)氧化物,在腐殖質(zhì)的形成過(guò)程中具有重要作用。
S-POD催化有機物質(zhì)氧化成醌,后者在430nm有特征光吸收。
Soil organic matter Quinone (430nm)
注意:實(shí)驗之前建議選擇 2-3 個(gè)預期差異大的樣本做預實(shí)驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。
需自備的儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計、臺式離心機、水浴鍋/恒溫培養箱、可調式移液器、0.5mol/L HCl溶液、1mL玻璃比色皿、30-50目篩、ym不允許快遞)、研缽、冰和蒸餾水。
操作步驟:
一、樣本處理(可適當調整待測樣本量,具體比例可以參考文獻)
新鮮土樣自然風(fēng)干或 37°C烘箱風(fēng)干,過(guò) 30-50 目篩。
二、測定步驟
1、 標準品處理:將標準品用0.5mol/L HCl溶液稀釋至0.1、0.08、0.06、0.04、0.02、0.01、0mg/mL,可參考下表。
序號 稀釋前濃度(mg/mL) 標準液體積(μL) 0.5 mol/L HCl 體積(μL) 稀釋后濃度(mg/mL)
1 0.2 500 500 0.1
2 0.2 400 600 0.08
3 0.2 300 700 0.06
4 0.2 200 800 0.04
5 0.2 100 900 0.02
6 0.2 50 950 0.01
7 - - 1000 0
備注:試驗中每個(gè)標準管需 1000μL 標準溶液。
2、 標曲測定:分光光度計預熱30min以上,調節波長(cháng)至430nm,0mg/mL管調零,直接測定稀釋后各標準管的吸光度,記為A標準。
3、 樣本測定:
試劑名稱(chēng) 測定管 對照管
風(fēng)干土樣(g) 0.05 0.05
蒸餾水 - 100
試劑一(μL) 400 400
試劑二(μL) 100 -
震蕩混勻,置于30°C水浴鍋準確反應1 h
試劑三(μL) 200 200
試劑四(μL) 1750 1750
振蕩數次,室溫靜置30min,用試劑四調零,取1mL上層液于430nm處測定吸光值A,記為A測定管、A對照管。
計算ΔA測定=A測定管-A對照管。每個(gè)測定管需設一個(gè)對照管。
三、S-POD 活力計算
1、標準曲線(xiàn)的建立
根據標準管的濃度(y,mg/mL)和吸光度A標準(x,A標準),建立標準曲線(xiàn)。根據標準曲線(xiàn),將ΔA測定(x)帶入公式計算測定中樣本的濃度y值(mg/mL)。
2、S-POD活力計算
單位的定義:每天每g土樣中產(chǎn)生1mg紫色沒(méi)食子素定義為一個(gè)酶活力單位。
S-POD活力(U/g 土樣)=y×V提取相÷W÷T=840×y
T:反應時(shí)間,1h=1/24d;V提取相:提取相總體積,1.75mL;W:樣本質(zhì)量,0.05g。
注意事項:
每個(gè)樣本均需做對照管。
相關(guān)系列產(chǎn)品:
BC0110/BC0115 土壤多酚氧化酶(S-PPO)活性檢測試劑盒
土壤過(guò)氧化物酶(S-POD) 活性檢測試劑盒本生生物公司供應:熒光定量PCR耗材,細胞培養類(lèi),核酸提取耗材,試劑包裝類(lèi),生物試劑,色素,原料,抗原抗體,試劑盒等,通用耗材包括深孔板、96孔硅膠墊、吸頭、封板膜、玻片、試管、量杯、試劑槽、離心管、移液器等。
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