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人蛋白質(zhì)二硫鍵異構酶(PDI)ELISA檢測試劑盒本生生物公司供應:ELISA試劑盒,血清,熒光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量離心管,進(jìn)口凍存管,細胞培養皿,培養板,培養瓶,吸頭,儀器及手套,色譜耗材,針頭過(guò)濾器。
貨號:BS-1477
規格:96T/48T
產(chǎn)品名:人蛋白質(zhì)二硫鍵異構酶(PDI)ELISA試劑盒
檢測種屬:人、大小鼠、豚鼠、兔子、豬、犬、牛羊、雞鴨、猴ELISA試劑盒等種屬。
保存條件及有效期:
1、試劑盒保存:2-8℃。
2、有效期:6個(gè)月
標記物:血清、血漿、組織勻漿等
【測試種屬】犬、大小鼠、人、豚鼠、兔子、牛羊、豬、雞鴨elisa試劑盒等種屬
【儲存方式】:2-8℃
【檢測目的】用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本。
【用途】科研實(shí)驗,不用于臨床診斷。
人ELISA試劑盒 人ELISAkit 試劑盒代測 蛋白質(zhì)二硫鍵異構酶(PDI)
人蛋白質(zhì)二硫鍵異構酶(PDI)ELISA檢測試劑盒
樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過(guò)程中如出現沉淀,應再次離心。
2. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應該再次離心。
3. 尿液:用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細胞培養上清:檢測分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應再次離心。
5. 組織標本:切割標本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻進(jìn)行,提取后應盡快進(jìn)行實(shí)驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
人蛋白質(zhì)二硫鍵異構酶(PDI)ELISA試劑盒操作步驟:
人蛋白質(zhì)二硫鍵異構酶(PDI)ELISA試劑盒組成:
試劑盒組成48 孔配置96 孔配置保存
說(shuō)明書(shū)1 份1 份
封板膜2 片(48)2 片(96)
密封袋1 個(gè)1 個(gè)
酶標包被板1×481×962-8℃保存
標準品:540μg/L0.5ml×1 瓶0.5ml×1 瓶2-8℃保存
標準品稀釋液1.5ml×1 瓶1.5ml×1 瓶2-8℃保存
酶標試劑3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
樣品稀釋液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
顯色劑 A 液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
顯色劑 B 液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
終止液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
濃縮洗滌液(20ml×20 倍)×1 瓶(20ml×30 倍)×1 瓶2-8℃保存
人蛋白質(zhì)二硫鍵異構酶(PDI)ELISA試劑盒ELISA測定的影響做如下討論。
血清是常用的ELISA標本,血漿一般可視為與血清同等的標本,標本引起的假陽(yáng)性和假陰性結果主要是干擾性物質(zhì)所致,分為內源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩種:
1. 內源性物質(zhì) 有人認為大約40%的人血清標本中含有非特異性干擾物質(zhì),可以不同程度影響檢測結果。常見(jiàn)的干擾物質(zhì)有:類(lèi)風(fēng)濕因子、補體、嗜異性抗體、嗜靶抗原自身抗體、醫源性誘導的抗鼠Ig (s)抗體、交叉反應物質(zhì)和其它物質(zhì)等。
外源性物質(zhì)
2. 外源性物質(zhì)常常是由于用于ELISA測定的血標本的采集、貯存等不當所致。如標本溶血、標本被細菌污染、標本貯存過(guò)久、標本凝集不全和采血管中添加物等影響。
(1)標本溶血 由于各種人為原因引起的標本溶血,均可因紅細胞破壞溶解時(shí)釋放出大量具有過(guò)氧化物酶活性的血紅蛋白,在以辣根過(guò)氧化物酶為標記的ELISA測定中,會(huì )導致非特異性顯色,干擾測定結果。為克服上述干擾作用,標本采集時(shí)必須注意避免溶血。
(2)標本受細菌污染 因菌體中可能含有內源性辣根過(guò)氧化物酶,因此,被細菌污染的標本同溶血標本一樣,亦可產(chǎn)生非特異性顯色而干擾測定結果。
(3)標本保存不當 在冰箱中保存過(guò)久的標本,血清中IgG可聚合成多聚體、AFP可形成二聚體,在間接法ELISA測定中會(huì )導致本底過(guò)深、甚至造成假陽(yáng)性;標本放置時(shí)間過(guò)長(cháng)(如一天以上),有時(shí)抗原或抗體免疫活性減弱,亦可出現假陰性。為克服上述干擾,ELISA測定的血清標本宜為新鮮采集;如不能立即測定,5天內測定的血清標本可存放于4℃,1周后測定的血清標本應低溫凍存;凍存后融解的標本,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應充分混合后再測定,但混勻時(shí)應輕柔,不可強烈振蕩。
(4)標本凝集不全 在沒(méi)有促凝劑和抗凝劑存在的情況下,正常血液采集后1/2~2h開(kāi)始凝固,18~24h*凝固。臨床檢驗工作中,有時(shí)為了爭取時(shí)間快速檢測,常在血液還未開(kāi)始凝固時(shí)即強行離心分離血清,此時(shí)的血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在ELISA測定過(guò)程中可以形成肉眼可見(jiàn)的纖維蛋白塊,易造成假陽(yáng)性結果;這類(lèi)情況于次日復查時(shí)因血凝已*,血清中不再有纖維蛋白原存在,故復查結果變?yōu)殛幮?。為避免上述干擾作用,解決的辦法是血液標本采集后必須使其充分凝固后再分離血清,或標本采集時(shí)用帶分離膠的采血管或于采血管中加入適當的促凝劑。
(5)標本管中添加物質(zhì)的影響 抗凝劑(如肝素,EDTA)、酶抑制劑(如NaN3可抑制ELISA系統中辣根過(guò)氧化物酶活性)及快速分離血清的分離膠等均對ELISA測定有一定干擾作用。 綜上所述,對臨床檢驗ELISA測定中出現的假陽(yáng)性或假陰性結果,在考慮試劑因素和操作因素之外,更多的應從標本因素方面進(jìn)行分析,并應采取相應措施排除干擾作用,從而為臨床提供正確可靠的檢測結果。
產(chǎn)品用途:可用于科研實(shí)驗,不用于臨床治療!
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