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人干擾素誘導蛋白44Elisa試劑盒說(shuō)明書(shū)
人干擾素誘導蛋白44(IFI44)Elisa試劑盒。本說(shuō)明書(shū)將為您提供詳細的使用指南,以確保您能夠準確、有效地進(jìn)行實(shí)驗操作。請您在使用前仔細閱讀,并按照步驟進(jìn)行操作。
一、產(chǎn)品概述 本試劑盒采用雙抗原夾心法測定標本中人干擾素誘導蛋白44(IFI44)的水平。通過(guò)純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,與待測樣品中的人干擾素誘導蛋白44結合,再與HRP標記的抗原結合,形成抗原-抗體-酶標抗原復合物。經(jīng)過(guò)洗滌后,加入底物TMB顯色,以測定樣品中IFI44的含量。
二、實(shí)驗準備
1. 請確保實(shí)驗環(huán)境清潔,避免污染。
2. 將試劑盒及所需試劑置于室溫下平衡30分鐘。
3. 準備實(shí)驗所需的加樣器、移液管、試管等器材,并確保其清潔干燥。
三、操作步驟
1. 加樣:按照實(shí)驗設計,分別設置空白孔、標準孔和待測樣品孔。在酶標包被板上準確加樣50μl標準品,待測樣品孔中先加入40μl樣品稀釋液,再加入10μl待測樣品(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣時(shí)請注意,樣品應加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
2. 溫育:用封板膜封板后,將酶標板置于37℃恒溫箱中溫育30分鐘。
3. 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水稀釋20倍,備用。
4. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干。每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
5. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
6. 再次溫育:同步驟2。
7. 再次洗滌:同步驟4。
8. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,置37℃避光顯色15分鐘。
9. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時(shí)藍色立轉黃色)。
10. 測定:在加終止液后15分鐘以?xún)?,使用酶標儀在450nm波長(cháng)下測定各孔的光密度(OD值)。
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