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　　ELISA原理：酶聯(lián)免疫吸附測定原理及應用方向

　　酶聯(lián)免疫吸附測定簡(jiǎn)介

　　酶聯(lián)免疫吸附測定法(Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay)，簡(jiǎn)稱(chēng)ELISA，是實(shí)驗室常用的檢測方法。 酶是能夠催化化學(xué)反應的特殊蛋白質(zhì)，其催化效力超過(guò)目前所有人造催化劑。ELISA是將酶催化的放大作用與特異性抗原抗體反應結合起來(lái)的一種微量分析技術(shù)。酶標記抗原或抗體以后，既不影響抗原抗體反應的特異性，也不改變酶本身的活性。因此ELISA具有準確性高、檢測時(shí)間短、價(jià)格低廉、判斷結果有客觀(guān)標準、結果便于記錄和保存等優(yōu)點(diǎn)，適合于大批標本的檢測，廣泛應用于食品安全檢測、醫療檢測以及免疫實(shí)驗分析等領(lǐng)域。

　　酶聯(lián)免疫吸附測定原理

　　ELISA必須遵守以下3個(gè)核心原理：

　　1)抗原或抗體能吸附于固相載體表面，并保持其免疫學(xué)活性;

　　2)抗原或抗體可通過(guò)共價(jià)鍵與酶連接形成酶結合物，而此種酶結合物仍能保持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性;

　　3)酶結合物與相應抗原或抗體結合后，可根據加入底物的顏色反應來(lái)判定是否有免疫反應的存在，而且顏色反應的深淺是與標本中相應抗原或抗體的量成正比例的，可根據已知濃度的抗原或抗體的顏色反應的深淺繪制標準曲線(xiàn)并依此計算出未知樣品中抗體或抗原的濃度。在ELISA中酶起到很關(guān)鍵的作用，常用于ELISA法的酶有辣根過(guò)氧化物酶，堿性磷酸酯酶等，其中尤以辣根過(guò)氧化物酶為多。酶結合物是酶與抗體或抗原, 半抗原在交聯(lián)劑作用下聯(lián)結的產(chǎn)物,它不僅具有抗體抗原特異的免疫反應，還能催化酶促反應，顯示出生物放大作用。

　　酶聯(lián)免疫吸附測定應用方向

　　ELISA應用的范圍很廣，而且正在不斷地擴大，原則上ELISA可用于檢測一切抗原、抗體及半抗原，可以直接定量測定體液中的可溶性抗原。在實(shí)際應用方面可用于疾病的臨床診斷、疾病監察、疾病普查、法醫檢查、獸醫及農業(yè)上的植物病害的診斷檢定等。因此，它和生物化學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、藥理學(xué)、流行病學(xué)及傳染病學(xué)等方面密切相關(guān)。按照待測物性質(zhì)的不同，ELISA反應可以分為抗原檢測反應及抗體檢測反應。

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