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細胞培養皿的使用須知、清潔步驟及使用注意事宜
培養皿是一種用于微生物或細胞培養的實(shí)驗室器皿,由一個(gè)平面圓盤(pán)狀的底和一個(gè)蓋組成,一般用玻璃或塑料制成。培養皿材質(zhì)基本上分為兩類(lèi),主要為塑料和玻璃的,玻璃的可以用于植物材料、微生物培養和動(dòng)物細胞的貼壁培養也可能用到。塑料的可能是聚乙x材料的,有一次性的和多次使用的,適合實(shí)驗室接種、劃線(xiàn)、分離細菌的操作,可以用于植物材料的培養。
細胞培養皿清潔步驟:
一般經(jīng)過(guò)浸泡、刷洗、浸酸、和清洗四個(gè)步驟。
1.浸泡:新的或用過(guò)的玻璃器皿要先用清水浸泡,軟化和溶解附著(zhù)物。新玻璃器皿使用前得先用自來(lái)水簡(jiǎn)單刷洗,然后用5%鹽酸浸泡過(guò)夜;用過(guò)的玻璃器皿往往附有大量蛋白質(zhì)和油脂,干涸后不易刷洗掉,故用后應立即浸入清水中備刷洗。
2.刷洗:將浸泡后的玻璃器皿放到洗滌劑水中,用軟毛刷反復刷洗。不要留死角,并防止破壞器皿表面的光潔度。將刷洗干凈的玻璃器皿洗凈、晾干,備浸酸。
3.浸酸:浸酸是將上述器皿浸泡到清潔液中,又稱(chēng)酸液,通過(guò)酸液的強氧化作用清除器皿表面的可能殘留物質(zhì)。浸酸不應少于六小時(shí),一般過(guò)夜或更長(cháng)。放取器皿要小心。
4.沖洗:刷洗和浸酸后的器皿都必須用水充分沖洗,浸酸后器皿是否沖洗的干凈,直接影響到細胞培養的成敗。手工洗滌浸酸后的器皿,每件器皿至少要反復“注水-倒空"15次以上,最后用重蒸水浸洗2-3次,晾干或烘干后包裝備用。
細胞培養皿注意事宜:
1、使用前經(jīng)過(guò)清潔消毒,培養皿清潔與否對工作影響較大,可影響培養基的酸堿度,若有某些化學(xué)藥品的存在,會(huì )抑制細菌生長(cháng)。
2、新購的培養皿應先用熱水沖洗,再置于質(zhì)量分數為1%或2%的鹽酸溶液中浸泡數小時(shí),使游離堿性物質(zhì)除去,再用蒸餾水沖洗2次。
3、若要培養細菌,再用高壓蒸氣(一般6.8*10的5次方Pa高壓蒸氣),120℃的溫度下30min滅菌,置室溫中干燥,或用干熱滅菌,就是將培養皿置于烘箱內,溫度控制在120℃左右的情況下維持2h,即可殺死細菌的胞牙。
4、經(jīng)過(guò)消毒的培養皿才能接種培養使用。
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