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本生闡述:成骨細胞礦化結節染色液(茜素紅s法)
骨代謝是破骨細胞骨吸收與成骨細胞骨形成的動(dòng)態(tài)平衡過(guò)程,成骨細胞負責骨基質(zhì)的合成、分泌、礦化,是骨重建激活或終止的控制者,它在骨組織的創(chuàng )傷修復、骨組織的生長(cháng)發(fā)育、骨量平衡中起著(zhù)重要作用,是骨質(zhì)疏松、骨折等骨病研究的主要焦點(diǎn)。成骨細胞分化是其主導骨形成的前提與基礎,在成骨分化過(guò)程中其最基本的生物學(xué)特征是骨基質(zhì)合成、分泌、礦化及成熟,而礦化結節是成骨細胞分化成熟的標志,同時(shí)也是成骨細胞行使成骨功能的主要形態(tài)學(xué)表現,觀(guān)察成骨細胞的礦化結節是研究成骨細胞分化的常用手段之一。成骨細胞礦化結節染色常用方法有四環(huán)素法和茜素紅S法,應用茜素紅溶液對成骨細胞染色,茜素紅可與鈣離子螯合,產(chǎn)生深紅色或紫紅色的復合物,可用于鑒定干細胞是否已成功向成骨細胞分化。該試劑僅用于科研領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。
產(chǎn)品組成:
2×50mlStorage
試劑(A):固定液50mlRT
試劑(B)茜素紅染色液50mlRT,避光
使用說(shuō)明書(shū)1份
自備材料:
1、磷酸緩沖鹽溶液(1×PBS,無(wú)鈣鎂)
2、蒸餾水
3、顯微鏡
操作步驟(僅供參考)
1、成骨細胞經(jīng)培養,胰酶消化,接種培養于6孔板中,每孔1×105個(gè)細胞。
2、細胞聯(lián)系觀(guān)察、換液,培養14天。
3、小心吸除培養液,加入足量固定液固定15min
4、磷酸鹽緩沖液(1×PBS)洗滌各孔3次,每次3min。
5、加入茜素紅s染色液600μL 染色30min,可根據染色情況酌情增加或減少染色時(shí)間。
6、蒸餾水洗去染色液,肉眼可見(jiàn)細胞呈明顯的紫紅色。
7、光鏡下觀(guān)察拍照。
染色結果:
鈣結節 紫紅色-深紅色
注意事項:
1、茜素紅s染色時(shí)間要根據鈣鹽的含量來(lái)確定,一般情況下30min即可。
2、固定液宜揮發(fā),開(kāi)啟后應密封保存;如使用量大可用95%乙醇替代。
特別提醒:
1) 本公司所有產(chǎn)品僅限于專(zhuān)業(yè)人員用于生命科學(xué)研究,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅。
2) 本公司所有產(chǎn)品必須由合格專(zhuān)業(yè)技術(shù)人員操作同時(shí)佩戴口罩/手套/實(shí)驗服并遵守生物實(shí)驗室安全操作規程!
成骨細胞礦化結節染色液(茜素紅s法) 天津本生 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承:遵紀守法,嚴于律己,寬仁以待,敢于承擔的企業(yè)精神作為標準,以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護和拓展市場(chǎng),較大限度的滿(mǎn)足客戶(hù)的需求。與客戶(hù)的共贏(yíng),是我們的發(fā)展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作,共創(chuàng )美好的未來(lái)。
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